Valor prognóstico das concentrações precoces de metaloproteinases -2 e -9 após traumatismo craniencefálico grave / Prognostic utility of early plasma matrix metalloproteinases -2 and -9 concentrations after severe traumatic brain injury

RESUMO Objetivo: Determinar se os níveis plasmáticos das metaloproteinases de matriz -2 e -9 tem associação com a mortalidade na unidade de terapia intensiva em pacientes com trauma craniencefálico grave, independentemente de lesões não cerebrais associadas. Métodos: Esta coorte prospectiva incluiu 39 pacientes do sexo masculino com trauma craniencefálico grave (escore na escala de coma Glasgow na admissão hospitalar: 3 - 8). Os níveis plasmáticos das metaloproteinases -2 e -9 foram determinados por ELISA no momento da admissão na unidade de terapia intensiva. Resultados: O trauma craniencefálico grave apresentou mortalidade de 46% na unidade de terapia intensiva. Concentrações mais elevadas de metaloproteinase -9 apresentaram associação com a mortalidade: 147,94 ± 18,00ng/mL para pacientes que sobreviveram e 224,23 ± 23,86ng/mL para os que não sobreviveram (média ± erro padrão, respectivamente; p = 0,022). Todavia, não houve associação significativa entre os níveis de metaloproteinase -2 e a mortalidade na unidade de terapia intensiva: 315,68 ± 22,90ng/mL para o grupo de sobreviventes e 336,55 ± 24,29ng/mL entre os pacientes que não sobreviveram (p = 0,499). Além disso, não se observaram associações significativas entre os níveis de metaloproteinase -2 (p = 0,711) ou metaloproteinase -9 (p = 0,092) e a presença de lesões não cerebrais associadas. Conclusão: Em vítimas de traumatismo craniencefálico grave, níveis elevados de metaloproteinase -9 tiveram valor preditivo para o desfecho fatal na unidade de terapia intensiva independentemente da presença de lesões não cerebrais associadas. Por outro lado, no mesmo cenário, os níveis plasmáticos de metaloproteinase -2 não apresentaram associação com a mortalidade na unidade de terapia intensiva

Abstract Objective: To determine whether the matrix metalloproteinases-2 and -9 plasma levels were associated with intensive care unit mortality in patients who suffered severe traumatic brain injury, despite the presence of extracerebral injuries. Methods: This prospective cohort enrolled 39 male patients who suffered severe traumatic brain injury (Glasgow coma scale: 3 - 8 at hospital admission). The plasma matrix metalloproteinase -2 and matix metalloproteinase -9 levels were determined by ELISA at the time of intensive care unit admission. Results: Severe traumatic brain injury was associated with a 46% intensive care unit mortality rate. Higher plasma matrix metalloproteinase -9 concentrations were associated with mortality: 147.94 ± 18.00ng/mL for survivors and 224.23 ± 23.86ng/mL for nonsurvivors (mean ± standard error of the mean, p = 0.022). In contrast, there was no significant association between matrix metalloproteinase -2 levels and intensive care unit mortality: 315.68 ± 22.90ng/mL for survivors and 336.55 ± 24.29ng/mL for nonsurvivors (p = 0.499). Additionally, there were no significant associations between matrix metalloproteinase -2 (p = 0.711) and matrix metalloproteinase -9 (p = 0.092) levels and the presence of associated lesions. Conclusion: Increased plasma matrix metalloproteinase -9 levels were associated with intensive care unit mortality following severe traumatic brain injury, regardless of the presence of extracerebral injuries. Conversely, in this same context, plasma matrix metalloproteinase -2 levels were not associated with short-term fatal outcome prediction.

Pain catastrophizing is associated with the Val66Met polymorphism of the brain-derived neurotrophic factor in fibromyalgia

Abstract Background: Fibromyalgia (FM) is a musculoskeletal chronic pain syndrome that impacts negatively patient's daily lives. Its pathogenesis is characterized by a complex relationship between biological and psychosocial factors not fully understood yet. Pain catastrophizing is associated with FM and is an important predictor of outcomes. This study aimed to answer two questions: (i) whether the allele and genotype frequencies of BDNF Val66Met (rs6265) polymorphism differs between FM patients and healthy controls (HC); and (ii) if the BDNF Val66Met polymorphism is a factor that predicts pain catastrophizing in FM. Methods: In a cross-sectional design, 108 FM patients and 108 HC were included. FM patients responded to the Brazilian Portuguese version of the Pain Catastrophizing Scale (BP-PCS) to assess pain catastrophizing, as well as other validated tools for anxiety (The State-Trait Anxiety Inventory - STAI), depression (Beck Depression Inventory II -BDI-II) and functional aspects (Fibromyalgia Impact Questionnaire - FIQ; Central Sensitization Inventory validated and adapted for Brazilian population - CSI-BP; Pittsburgh Sleep Quality Index - PSQI; and Resilience Scale). All subjects were genotyped for the BDNF Val66Met polymorphism. Results: Val allele was significantly more frequent in FM patients compared to the control group (p < 0.05). Also, FM patients with Val/Val genotype showed more pain catastrophizing thoughts, and this genotype was significantly associated with magnification and rumination dimensions of BP-PCS (p < 0.05). Furthermore, there were significant differences in levels of anxiety and symptoms of depression, years of education, and the functional situation between the FM and control groups. Conclusions: The findings show an association of BDNF Val66Met polymorphism with pain catastrophizing in FM, which opens new avenues to comprehend the interplay between molecular genetic characteristics and neuroplasticity mechanisms underpinning FM.(AU)

Valor prognóstico dos níveis de DNA circulante em pacientes graves e em pacientes com trauma / Prognostic value of circulating DNA levels in critically ill and trauma patients

Nos últimos anos, o número de estudos que investigam os ácidos nucleicos circulantes como potenciais biomarcadores tem aumentado. A detecção desses biomarcadores é uma alternativa minimamente invasiva para o diagnóstico e o prognóstico de diversas condições clínicas. O valor dos níveis de DNA circulante como biomarcador preditivo foi demonstrado em pacientes com numerosas patologias agudas que apresentam riscos elevados de necessitar cuidados intensivos e de sofrer mortalidade hospitalar. Os mecanismos pelos quais os níveis de DNA circulante aumentam em pacientes com essas condições ainda são obscuros. Nesta revisão, focalizamos o potencial uso deste biomarcador para predição prognóstica em pacientes graves e pacientes com trauma. A revisão da literatura foi feita por meio de busca no MedLine utilizando o PubMed em inglês.

The number of studies investigating circulating nucleic acids as potential biomarkers has increased in recent years. The detection of such biomarkers is a minimally invasive alternative for the diagnosis and prognosis of various clinical conditions. The value of circulating DNA levels as a predictive biomarker has been demonstrated in patients suffering from numerous acute pathologies that have a high risk of intensive care needs and in-hospital deaths. The mechanism by which circulating DNA levels increase in patients with these conditions remains unclear. In this review, we focused on the potential use of this biomarker for prognosis prediction in critically ill and trauma patients. The literature review was performed by searching MedLine using PubMed in the English language.

Ausência de associação entre polimorfismo do gene da interleucina-1 beta e o prognóstico de pacientes com traumatismo crânio-encefálico grave / Lack of association between interleukin-1 gene polymorphism and prognosis in severe traumatic brain injury patients

OBJETIVO: O traumatismo crânio-encefálico é a principal causa de óbito em indivíduos com idade entre 1 a 45 anos. O desfecho do traumatismo crânio-encefálico pode estar relacionado, além de fatores pré-morbidade e gravidade do dano, com fatores genéticos. Genes que podem ter relação com o resultado pós-trauma vêm sendo estudados, porém, ainda existem poucas informações sobre a associação entre polimorfismos genéticos e o desfecho do traumatismo crânio-encefálico. O gene da interleucina-1 beta (IL-1B) é um dos genes estudados, pois esta citocina encontra-se em níveis elevados após o traumatismo crânio-encefálico e pode afetar de forma negativa seu desfecho. O objetivo do presente estudo foi analisar o polimorfismo -31C/T, localizado na região promotora do gene IL-1B, em pacientes com traumatismo crânio-encefálico grave visando correlacioná-lo com o desfecho primário precoce (alta do centro de terapia intensiva ou morte). MÉTODOS: Foram estudados 69 pacientes internados por traumatismo crânio-encefálico grave em três hospitais de Porto Alegre e região metropolitana. O polimorfismo foi analisado através da reação em cadeia da polimerase, seguida da digestão com enzima de restrição. RESULTADOS: O traumatismo crânio-encefálico grave foi associado a uma mortalidade de 45 por cento. Não foram observadas diferenças significativas nas frequências alélicas e genotípicas entre os grupos de pacientes divididos pelo desfecho do traumatismo crânio-encefálico. CONCLUSÃO: Nossos resultados sugerem que o polimorfismo -31C/T do gene IL-1B não tem impacto significativo no desfecho fatal dos pacientes com traumatismo crânio-encefálico grave.

OBJECTIVE: Traumatic brain injury is the major cause of death among individuals between 1-45 years-old. The outcome of traumatic brain injury may be related to brain susceptibility to the injury and genetic factors. Genes that may affect traumatic brain injury outcome are being investigated, however there is still few data concerning the association between genetic polymorphisms and traumatic brain injury outcome. The interleukin-1 beta gene (IL-1B) is one of the most studied genes, because levels of this cytokine are raised after traumatic brain injury and this can affect worsen the prognosis. The aim of this study was to test whether the -31C/T polymorphism, located at the promoter region of the IL-1B gene, is associated with primary short-term outcome (death or intensive care unit discharge) in severe traumatic brain injury patients. METHODS: Were studied 69 patients admitted with severe traumatic brain injury in three hospitals of the metropolitan region of Porto Alegre. The polymorphism was analyzed by polymerase chain reaction, followed by restriction digestion. RESULTS: Severe traumatic brain injury was associated with a 45 percent mortality rate. No significant differences were observed in the allele and genotype frequencies between patients stratified by traumatic brain injury outcome. CONCLUSION: Our findings suggest that -31C/T IL-1B gene polymorphism have no significant impact on the outcome of patients after acute severe traumatic brain injury.

Biomarcadores prognósticos no traumatismo crânio-encefálico grave: [revisão] / Outcome biomarkers following severe traumatic brain injury: [review]

O trauma é a principal causa de morte em pessoas entre 1 e 44 anos de idade. O traumatismo crânio-encefálico é o principal fator determinante da mortalidade e da morbidade decorrentes do trauma. A predição do prognóstico é um dos principais problemas associados ao traumatismo crânio-encefálico grave, já que o valor preditivo variável da avaliação clínica complica a identificação de pacientes com maior risco para desenvolvimento de lesões secundárias e desfecho fatal. Devido a estas questões, há considerável interesse no desenvolvimento de biomarcadores que reflitam a gravidade do dano cerebral e que se correlacionem com mortalidade e prognóstico funcional em longo prazo. As proteínas S100B e enolase neuronal específica estão entre os marcadores mais estudados para este fim, mas há também estudos com a proteína glial fibrilar ácida, a creatinino quinase cerebral, a proteína mielina básica, o ácido desoxirribonucléico plasmático, a proteína de choque quente 70, o fator von Willebrand, as metaloproteinases, o fator neurotrófico derivado do cérebro, dentre outros. Evidências sugerem que a inflamação, o estresse oxidativo, a excitotoxicidade, as respostas neuroendócrinas e a apoptose têm um importante papel no desenvolvimento de lesões secundárias. Marcadores envolvidos nestes processos também estão sendo estudados no traumatismo crânio-encefálico. Revisamos estes marcadores, muitos dos quais apresentam resultados promissores para uma futura aplicação clínica.

Trauma is the leading cause of death of people from 1 to 44 years of age. Traumatic brain injury is the main determinant for mortality and morbidity caused by trauma. Outcome prediction is one of the major problems related to severe traumatic brain injury because clinical evaluation has an unreliable predictive value and complicates identification of patients with higher risk of developing secondary lesions and fatal outcome. That is why, there is considerable interest in development of biomarkers that reflect the severity of brain injury and correlate with mortality and functional outcome. Proteins S100B and neuron specific enolases are among the markers most studied for this purpose, however some studies are investigating glial fibrillary acidic protein, creatinine phospokinase, isoenzime B, myelin basic protein, plasma desoxiribonucleic acid, heat shock protein 70, von Willebrand factor, metalloproteinases and brain-derived neurotrophic factor, among others. Evidence suggests that inflammation, oxidative stress, excitotoxicity, neuroendocrine responses and apoptosis play an important role in the development of secondary lesions. Markers involved in these processes are being studied in traumatic brain injury. We reviewed these biomarkers, some of which present promising results for future clinical application.

Expressão de p53, p16 E COX-2 em carcinoma escamoso de esôfago e associação histopatológica / p53, p16 E COX-2 expression in esophageal squamous cell carcinoma and histopathological association

RACIONAL: O câncer de esôfago representa cerca de 2 por cento dos tumores malignos e a terceira causa mais comum de câncer do trato gastrointestinal. A associação do prognóstico do câncer de esôfago com alguns marcadores imunoistoquímicos, como as proteínas p53, p16 e a ciclooxigenase 2 (COX-2) tem sido relatada. A detecção de marcadores moleculares através de imunoistoquímica pode ser utilizada para avaliação prognóstica. OBJETIVOS: Investigar a associação entre a expressão das proteínas p53, p16 e a COX-2 com o estádio do carcinoma escamoso de esôfago. MÉTODOS: Foram analisadas 31 amostras de ressecção cirúrgica por esofagectomia diagnosticadas como carcinoma de células escamosas de esôfago e 31 amostras não-tumorais referentes a cada caso. Realizou-se a revisão histopatológica e o estádio pTNM. Amostras tumorais e não-tumorais adjacentes foram submetidas a análise imunoistoquímica para avaliar o conteúdo das proteínas p53, p16 e COX-2. Foi considerada positiva a expressão nuclear para p53 em quantidade igual ou superior a 10,00 por cento das células e presença da expressão citoplasmática de acordo com três escores (1, 2, 3) de intensidade (leve, moderada, acentuada) de imunocoloração para COX-2. RESULTADOS: Em área tumoral, as análises revelaram 48,38 por cento de positividade para p53, 16,12 por cento de positividade para p16, e 100,00 por cento de positividade escores 1+, 2+ ou 3+ para COX-2. No entanto, quando se avaliou possível relação da expressão destes marcadores com o estádio, apenas a COX-2, escore 3+ intensidade acentuada mostraram associação significativa. CONCLUSÃO: O presente estudo demonstrou que existe relação positiva entre a expressão de COX-2, escore 3+ e estádio mais avançado no carcinoma de esôfago.

BACKGROUND: The esophageal carcinoma represents about 2 percent of malignant tumors and is the third most common cause of gastrointestinal cancer. The correlation between immunohistochemistry markers, such as p53, p16 and COX-2 proteins and cancer esophageal prognosis has been suggested. AIMS: To Investigate whether the expression of p53, p16 and COX-2 proteins are associated to tumor staging. METHODS: For this purpose we proceeded immunohistochemistry assays and TMN in 31 esophageal tumor and normal tissue samples. The p53 nuclear expression was considered positive when it appears in 10.00 percent or more cells. COX-2 expression was scored according to intensity in three scores (1+, 2+, 3+). RESULTS: On the tumor samples the results presented 48.38 percent positivity for p53, 16.12 percent for p16 and 100 percent with 1+, 2+ or 3+ scores for COX-2. However, when we investigated whether the expression of p53, p16 and COX-2 proteins are related to tumor staging, only COX-2 expression, score 3+, had shown statistical significant association. CONCLUSION: Therefore, in the present study we could see positive correlation between COX-2 protein and high grade tumor as well as advanced tumor staging in esophageal carcinoma.

Expressão das proteínas p53 e Cox-2 em adenocarcinoma intestinal e mucosa adjacente / Expression of p53 and Cox-2 proteins in intestinal adenocarcinoma and adjacent mucosa

Este estudo teve como objetivo verificar se existe associação entre o estadiamento do tumor e a expressão das proteínas p53 e Ciclooxigenase-2 (Cox-2) em adenocarcinoma de intestino. Foi realizado um estudo retrospectivo de 40 blocos de parafina contendo amostras obtidas de ressecção cirúrgica de tecido intestinal anteriormente diagnosticado como adenocarcinoma de intestino humano. O material foi coletado no período entre 1998 e 2003 no Hospital Universitário de Santa Maria, RS, Brasil. Como controle, foram utilizadas amostras de áreas não tumorais de mucosa adjacente, referentes a cada caso (n = 40). Utilizamos a imuno-histoquímica para analisar este material quanto à expressão das proteínas p53 e Cox-2. A expressão das proteínas p53 e Cox-2 foi significativamente maior em tecido tumoral quando comparada com mucosa adjacente. Detectamos positividade total para Cox-2 (100 por cento), e parcial (70 por cento) para p53 em tecido tumoral. Foi verificada associação significativa entre expressão da proteína p53 e estadiamento segundo Astler-Coller, mas não com a classificação TNM. Quanto à proteína Cox-2, não foi observada associação significativa com estadiamento do tumor de intestino. Os achados sugerem que existe uma tendência entre a expressão da proteína p53 e Cox-2 com o estadiamento do tumor, sendo necessária comprovação com estudos futuros.

The objective of this study is to establish a possible association between staging and the expression of p53 and cyclooxygenase-2 (Cox-2) proteins in intestinal adenocarcinoma. A retrospective study of 40 embedded paraffins with surgical specimens of intestinal Adenocarcinoma was performed. The samples were collected during 1998 and 2003 at Hospital Universitário de Santa Maria, RS, Brasil. Samples of non-tumoral tissues (n = 40) were used as a negative control. The expression of p53 and Cox-2 was immunohistochemically studied. The expression of p53 and Cox-2 proteins was significantly higher in the tumor material when compared to the normal adjacent mucosa. Cox-2 expression was found in 100 percent of tumoral cases, while p53 expression was noted in 70 percent of tumor blocks. There is significantly association between the expression of p53 protein and Astler-Coller staging, but no with TNM-stage. There was no significant correlation between Cox-2 expression and intestinal adenocarcinoma staging. Our findings suggest that the expression of p53 and Cox-2 proteins could have association with Astler-Coller staging.

Morte celular por apoptose / Apoptosis: programmed cell death

Apoptose, ou morte celular programada, é um processo essencial para a manutenção do desenvolvimento dos seresvivos, sendo importante para eliminar células supérfluas ou defeituosas. Durante a apoptose, a célula sofre alterações morfológicas características desse tipo de morte celular. Tais alterações incluem a retração da célula, perda de aderência com a matriz extracelular e células vizinhas, condensação da cromatina, fragmentação internucleossômicado DNA e formação dos corpos apoptóticos. Muitas são as moléculas envolvidas no controle das vias de ativaçãoda apoptose, dentre estas, as proteínas antiapoptóticas e pró-apoptóticas, além das caspases. Esse fenômeno biológico,além de desempenhar um papel importante no controle de diversos processos vitais, está associado a inúmeras doenças, como o câncer. A compreensão dos mecanismos apoptóticos permitiu o desenvolvimento de novas estratégias no tratamento do câncer. Tais estratégias são embasadas na indução da morte nas células tumorais e em uma maior resposta aos tratamentos com radiação e agentes citotóxicos.

Effects of irinotecan/5-fluorouracil combination on thymidylate synthase and cell cycle in human colon carcinoma cell line

Thymidylate synthase (TS) is responsible for the de novo synthesis of thymidylate,which is required for DNA synthesis and repair TS and is an important target for 5-fluorouracil (5-FU). In this study we investigated whether the greater cytotoxicity of irinotecan (CPT-11) followed by 5-FU in HT-29 and SNU-C4 cell lines was related to TSmRNA expression or activity. Thus, cells were exposed for 24 h to each drug, alone or in combination, and assessed for colony formation, TS catalytic activity, TS-mRNA expression and cell cycle distribution. Pre-treatment with CPT-11 at IC20 increased the 5-FU cytotoxicity in HT-29 and SNU-C4 cells. TS catalytic activity and TS-mRNA expression suggested that the differences in sensitivity to 5-FU among the cell lines were not correlated to TS profile. When we exposed cells to CPT-11 at IC20 and subsequently to 5-FU at IC50, the impact on TS activity and mRNA expression were the same as observed with 5-FU alone. CPT-11 induced G2/M arrest, while 5-FU arrested cells in S-phase in both cell lines. When cells were treated with CPT-11 followed by 5-FU we observed an increased in 5-FU-inducible S-phase arrest in both cell lines. Our findings suggested that the greater cytotoxicity of CPT-11/5-FU combination in HT-29 and SNU-C4 cell lines are not related to interference with thymidylate synthase.

Atividades da monitoria do Departamento de Medicina Interna no novo curriculo da Faculdade de Medicina UFRGS / Activities of the Department of Internal Medicina Monitors in the new curriculum of the Medical School/UFRGS

Apos a instituicao do novo curriculo da Faculdade de Medicina da UFRGS, no segundo semestre de 1990, a atividade de Monitoria do Departamento de Medicina Interna permanece um importante instrumento de ensino/aprendizagem, tendo sido ampliado seu campo de atuacao. Das 6 disciplinas do Departamento de Medicina Interna, em 3 sao desenvolvidas atividades didaticas pelo grupo de 9 monitores deste departamento. As adaptacoes do programa de monitoria para o novo curriculo da Medicina e as atividades desenvolvidas pelo monitor, tradicionalmente com otima aceitacao por parte de alunos e professores, sao descritas neste artigo. Salienta-se a importancia deste processo de aquisicao e transmissao de conhecimentos para a formacao do monitor como aluno, alem de seu papel de intregracao entre os corpos docente e discente nas atividades de ensino